霍亂弧菌顯色培養基

用途:

用於水產品及食物中毒樣品中霍亂弧菌的分離和鑑定。


原 理:
蛋白腖和酵母膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;蔗糖為可發酵的醣類;抑菌劑抑制大部分非霍亂弧菌細菌,氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;色素與霍亂弧菌所具有的酶發生特異性反應,水解底物,釋放出顯色基團,在淡黃色平板上產生綠-藍綠色的菌落。


配方(每升):
蛋白腖     15g
酵母膏粉  5g
蔗糖        10g
氯化鈉     5g
抑菌劑     5g
瓊脂        13g
色素        3.1g

最終pH 9.0±0.2


使用方法
1、取瓶內乾粉56.1克,用100ml蒸餾水或純水溶解,可按比例擴增或縮小。攪拌加熱煮沸至完全溶解,不需高壓滅菌,冷至約50℃,傾注滅菌平皿。
2、以無菌操作取檢樣25 g(mL),加入鹼性蛋白腖水225 mL,用旋轉刀片式均質器以8 000 r/min均質1 min,或拍擊式均質器拍擊2 min,製備成1:10的均勻稀釋液。如無均質器,則將樣品放入無菌乳缽中磨碎,然後放在500 mL的滅菌容器內,加225 mL鹼性蛋白腖水,並充分振盪。
3、增菌:將上述1:10稀釋液於36 ℃±1 ℃培養6h~8h,如有需要可進行二次增菌。
4、分離
在增菌液中用接種環取一環,於霍亂弧菌顯色平板上劃線分離,於36 ℃±1 ℃培養18 h~24 h。
5、通過驗證試驗進一步確認假定性霍亂弧菌,如氧化酶、革蘭氏染色等。


質量控制:
本品傾注平皿後呈淡黃色,下列菌株接種後36±1℃培養18-24小時生長情況如下表:

霍亂弧菌顯色培養基02.png


注:最後的鑑定須做補充試驗。

外觀:
脫水培養基:淺黃色具流動性粉未。
製備好平板:淡黃色的膠。
儲存條件和保質期:
脫水培養基:10-30℃,保質期二年。製備好平板: 2-8℃,最多保存兩週。

結果判斷:

霍亂弧菌顯色培養基01.png



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