大腸菌群顯色培養基

用途:

用於大腸菌群的快速檢測和計數。


原理:

蛋白腖和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑;十二烷基硫酸鈉抑制革蘭氏陽性菌;顯色底物與大腸菌群β-半乳萄糖苷酶發生特異性反應,水解底物,釋放出顯色基團,在淡黃色平板上產生綠色的菌落。


培養基配方(每升):

蛋白腖                    10g

酵母膏粉                 3g

氯化鈉                    5g

十二烷基硫酸鈉       0.1g

瓊脂                       12g

顯色底物                 2.7g

最終pH 7.0±0.2


使用方法:

1、稱取本品32.8g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,無需高壓滅菌。

2、以無菌手續取樣品25g或25mL,加入含225mL無菌磷酸鹽緩衝液(或生理鹽水)的三角瓶內,充分振搖或用均質器均質1min成1:10稀釋液,然後以1:10繼續稀釋,選擇三個適宜的連續稀釋度,每個稀釋度接種兩個平皿。

3、採用傾注法:將培養基水浴冷卻至約50℃,準備直徑90mm已滅菌平皿,每個培養皿接種1ml樣品,然後傾注約15ml上述溶解的培養基,混勻使其凝固,倒置, 37℃培養24小時。

4、採用表面接種法:冷卻至約50℃,搖勻將培養基傾注於已滅菌平皿中。  在室溫可保存一天或在冰箱裡貯存數天(避光,4℃)。  樣品用劃線接種法或濾膜法,37℃培養24小時。

5、觀察結果。


質量控制:

本品傾注平皿後呈淡黃色,下列菌株接種後於36±1℃培養18~24h生長情況如下表:

大腸菌群顯色培養基 表格.png


貯存:貯存於10-30℃,避光、陰涼乾燥處,用後立即旋緊瓶蓋。  貯存期二年。




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