大腸菌群檢驗紙片-Ⅲ

規格:10份/盒(9袋/份) 


適用範圍:廣泛應用於食品、飲料飲用純淨水中的大腸菌群的檢測。 適用範圍:廣泛應用於食品、飲料飲用純淨水中的大腸菌群的檢測。 


檢驗方法:(參考GB 4789.3-2003) 


樣品處理: 

以無菌操作將檢樣25ml(或25g)放於含有225ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(瓶內預置適當數量的玻璃珠),經充分振搖或研磨做成1:10的均勻稀釋液。 以無菌操作將檢樣25ml(或25g)放於含有225ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(瓶內預置適當數量的玻璃珠),經充分振搖或研磨做成1:10的均勻稀釋液。 固體樣品最好用均質器,以8000~10000r/min的速度處理1min,做成1:10的均勻稀釋液;用1ml滅菌吸管吸取1:10稀釋液1ml,注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內,製成1:100的均勻稀釋液;按上一步操作依次做10倍遞增稀釋液。 固體樣品最好用均質器,以8000~10000r/min的速度處理1min,做成1:10的均勻稀釋液;用1ml滅菌吸管吸取1:10稀釋液1ml,注入含有9ml滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內,製成1:100的均勻稀釋液;按上一步操作依次做10倍遞增稀釋液。 

② 接種: 

根據食品衛生標準要求或對樣本污染情況的估計,選擇適宜稀釋度的稀釋液,吸取三份10 mL分別塗布於3袋大紙片;三份1 mL分別塗布於3袋小紙片;另取1 mL再稀釋10倍後,吸取三份1 mL分別塗布於3袋小紙片。 根據食品衛生標準要求或對樣本污染情況的估計,選擇適宜稀釋度的稀釋液,吸取三份10 mL分別塗佈於3袋大紙片;三份1 mL分別塗佈於3袋小紙片;另取1 mL再稀釋10倍後,吸取三份1 mL分別塗佈於3袋小紙片。 而後用手將檢驗紙片輕輕壓平,袋口朝上豎直放置於恒溫培養箱(35~37℃)內培養18~24h,然後觀察結果。 而後用手將檢驗紙片輕輕壓平,袋口朝上豎直放置於恆溫培養箱(35~37℃)內培養18~24h,然後觀察結果。 

③ 結果判斷:

陰性結果:紙片保持紫藍色不變,無論有否紅色斑點或紅暈均判為大腸菌群陰性。 陰性結果:紙片保持紫藍色不變,無論有否紅色斑點或紅暈均判為大腸菌群陰性。 

陽性結果:紙片上呈現紅色斑點或紅暈,其周圍變黃或整個紙片變黃均判為大腸菌群陽性。 陽性結果:紙片上呈現紅色斑點或紅暈,其周圍變黃或整個紙片變黃均判為大腸菌群陽性。 

④ 結果報告: 

根據陽性反應的紙片數查相應的大腸菌群MPN表,得數據乘以稀釋倍數,以此為結果,報告每100mL(g)檢樣內大腸菌群的MPN值(見附表) 根據陽性反應的紙片數查相應的大腸菌群MPN表,得數據乘以稀釋倍數,以此為結果,報告每100mL(g)檢樣內大腸菌群的MPN值(見附表) 


注意事項: 

1、 應避光低溫(10℃以下)保存,並注意防潮,如發現紙片變為粉紅色即為失效。 1、應避光低溫(10℃以下)保存,並註意防潮,如發現紙片變為粉紅色即為失效。 

2﹑ 檢查食(飲)品時,凡酸性檢樣應以100g/L無菌碳酸鈉溶液調pH至中性後,方可進行稀釋接種。 2﹑檢查食(飲)品時,凡酸性檢樣應以100g/L無菌碳酸鈉溶液調pH至中性後,方可進行稀釋接種。 

3、 可疑結果的判斷:

大腸菌群菌量的多少與結果的顯示密切相關,可出現3種不同現象:(1) 菌量較大(≥103cfu/mL),整個紙片變黃而又無紅色斑點(或紅暈);(2) 菌量適中(102~103 cfu/mL),整個紙片也變黃,但有小而密集的紅色斑點;(3) 菌量較少(≤102 cfu/mL),紙片可呈紫藍色,並有散在或較密集的紅色斑點,其周圍變黃。 大腸菌群菌量的多少與結果的顯示密切相關,可出現3種不同現象:(1)菌量較大(≥103cfu/mL),整個紙片變黃而又無紅色斑點(或紅暈); (2)菌量適中(102~103 cfu/mL),整個紙片也變黃,但有小而密集的紅色斑點;(3)菌量較少(≤102 cfu/mL),紙片可呈紫藍色,並有散在或較密集的紅色斑點,其周圍變黃。 因此菌量較大時,可能出現可疑現象。 因此菌量較大時,可能出現可疑現象。 此時應通過加大樣品稀釋度或進一步做復發酵進行證實。 此時應通過加大樣品稀釋度或進一步做復發酵進行證實。 其他可疑現象也可通過復發酵實驗進行確認。 其他可疑現像也可通過復發酵實驗進行確認。 

4 、 確認試驗的方法:

進行確認試驗,用滅菌攝子無菌操作將可疑紙片移種到乳糖發酵管裏,置37 ℃ 24小時培養後,對其產酸產氣者判為大腸菌群陽性,否則判為陰性。 進行確認試驗,用滅菌攝子無菌操作將可疑紙片移種到乳糖發酵管裡,置37 ℃ 24小時培養後,對其產酸產氣者判為大腸菌群陽性,否則判為陰性。 


附表:

大腸菌群檢驗紙片-Ⅲ.png


大腸菌群最可能數(MPN)檢索表(總接種量33.3ml,其中3份10ml水樣,3份1ml水樣,3份0.1ml水樣) 大腸菌群最可能數(MPN)檢索表(總接種量33.3ml,其中3份10ml水樣,3份1ml水樣,3份0.1ml水樣) 

 



回最頂