大腸桿菌O157乳膠凝集試劑盒

規格: 50 tests

一、用途

大腸桿菌O157乳膠凝集檢測試劑用於從糞便樣品中經選擇性平板分離的可疑菌落進行快速乳膠凝集確證鑑定。  可從病人腹瀉樣品中分離出的菌落快速區分大腸O157與其它大腸桿菌血清型。  該試劑盒僅供專業人員使用。


二、原理

乳膠顆粒表麵包被與大腸桿菌O157脂多醣抗原具有特異性的抗體。  當敏化的乳膠顆粒遇到含有O157抗原的菌懸液時,可發生特異性、高靈敏度的免疫化學反應,使分散的乳膠微粒迅速形成肉眼可見的凝集。


三、試劑盒組成成分

REAG TEST測試試劑HM44a大腸桿菌O157乳膠測試試劑2.5mL

乳膠顆粒包被與大腸桿菌O157具有特異性的兔抗血清。  含0.099%的疊氮化鈉防腐劑。  (藍色瓶蓋)

REAG CONTROL對照試劑HM44b對照乳膠試劑2.5mL

乳膠顆粒包被不與大腸桿菌O157反應的兔抗體,含0.099%的疊氮化鈉防腐劑。  (黑色瓶蓋)

NaCl 0.85% 0.85%鹽水HM40 0.85%生理鹽水5.0mL

含0.099%的疊氮化鈉防腐劑。  (白色瓶蓋)

使用說明書

檢測板

攪拌棒

需要的其它材料

l接種環

l山梨醇麥康凱瓊脂(含1%D-山梨醇不含乳糖的麥康凱瓊脂)


四、警告和注意事項

安全:

1、試劑僅供體外診斷使用。

2、試劑盒作防腐劑使用的疊氮化鈉可與鉛或銅製品反應形成易爆的金屬疊氮化物。  可用大量水沖洗以避免疊氮化物的堆積。

3、在處理或檢測可疑致病菌時應採取適當的預防措施。  被污染的物品可用3%的次氯酸鈉消毒處理30分鐘。  含酸的廢液應作中和處理。

檢測過程:

1、大腸桿菌O157乳膠凝集試劑盒應按說明書使用。

2、所有試劑在使用前應達到室溫。

3、不要稀釋試劑盒內的任何試劑

4、不要混合不同批次試劑盒的試劑。

5、不要冷凍試劑盒內的試劑。

6、不要使檢測乳膠試劑的滴管接觸到陽性對照試劑或細菌樣品。

7、使用前應確保檢測板清潔乾燥。

8、試驗時應注意檢測過程中的質量控制部分。

9、注意凝集狀態,呈凝乳狀或纖維狀可能為非真實凝集。


五、貯存及保質期

檢測試劑盒不 使用時應貯存在2~8℃,並應在包裝盒標籤上的有效期內使用檢測試劑。


六、樣本

病人的樣品(血糞便樣品)應在山梨醇麥康凱瓊脂培養基上分離培養,35~37℃有氧培養18~24小時。  產毒素的大腸桿菌O157:H7菌落顏色為無色,菌落形態與其它的大腸桿菌相似。


七、檢測過程

質量控制:

在每次使用檢測試劑盒前應作下列質量控制檢測以確證試劑的有效性

1、檢測試劑的控制:分別滴1滴測試試劑(HM44a)和1滴對照試劑(HM44b)於檢測板的二個反應環內。  並在該兩個反應環內再分別各滴加1滴生理鹽水(HM40),各用1支攪拌棒在整個區域內混勻液體,輕搖檢測板30秒,觀察2個反應環內是否會出現凝集。  如果出現凝集反應,表明測試試劑、對照試劑或生理鹽水可引起非特異性凝集,應廢棄處理。

2、陽性對照的控制:按測試程序(如下所述),在檢測板的二個反應環內各滴1滴已知的大腸桿菌O157菌懸液,輕搖檢測板30秒,觀察2個反應環內是否會出現自動凝集。  如果二個反應環內均無凝集反應,則分別滴1滴測試試劑(HM44a)和1滴對照試劑(HM44b)於2個測試反應環內,然後分別混勻檢測試劑與菌懸液,輕搖檢測板,觀察2個反應環內凝集結果,測試試劑反應環內應出現明顯凝集,對照試劑反應環內應無凝集發生。  如果未出現此2種現象,說明試劑失效或污染,應廢棄處理。

測試程序:

1、各滴1滴(約30μL)生理鹽水(HM40)於檢測板的2個反應環內。

2、用接種環從山梨醇表康凱瓊脂平板上挑取無色的可疑菌落。

3、與反應環內的生理鹽水混合,形成均勻的混濁的菌懸液,並將菌懸液均勻塗佈於整個反應環內。

4、輕搖檢測板30秒,觀察是否會出現自動凝集現象。  如果菌懸液保持均勻狀態,繼續第5步。  如果菌懸液出現纖維狀或顆粒狀自凝現象,在加入乳膠試劑後易出現假陽性結果,因此這種樣品不適合採用乳膠試劑檢測。  應選用其它方法檢測。

5、搖勻乳膠測試試劑。

6、將1滴乳膠測試試劑和1滴對照試劑分別滴加至2個反應環內的菌懸液。  不要使試劑的滴管接觸到菌懸液。

7、兩個反應環分別用1支乾淨的攪拌棒將菌懸液和乳膠試劑混合均勻。

8、輕輕搖動檢測板,在2分鐘內觀察結果,凝集反應會產生明顯的乳膠顆粒凝集現象。

9、記錄結果後,將攪拌棒和檢測板進行適當的消毒處理。


八、結果說明

按下表進行判斷結果

大腸桿菌O157乳膠凝集試劑盒.png




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