營養瓊脂(NA)瓶裝顆粒培養基

【規格、產品形態及包裝形式】

規格: 250g/瓶   產品形態:顆粒型   包裝形式:瓶裝

 

【產品用途】

用於細菌總數測定、純培養及保存菌種,也可用於消毒效果測定。

 

【檢驗原理】

蛋白腖和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;氯化鈉能維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑。

 

【配方成分】

配方(每升)  含量

蛋白腖       10g

牛肉膏粉    3g

氯化鈉       5g

瓊脂          15g

最終pH 7.3±0.2

 

【使用方法】

1、稱取本品33g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用。

 

2、(食品)以無菌操作稱取檢樣25克(或25mL),放入含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的玻璃三角瓶中(瓶內預置適當數量的玻璃珠),充分振搖,即為1:10的均勻稀釋液。依次做1:100,1:1000……稀釋液。

 

3、根據對樣品污染情況的估計,選擇2—3個合適的稀釋度,分別在做10倍稀釋的同時,吸取1mL稀釋液於滅菌平皿中,每個稀釋度做2個平皿。

 

4、稀釋液移入平皿後應及時將涼至46℃左右的培養基注入平皿約15mL,並轉動平皿使混合均勻,同時將營養瓊脂培養基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內作空白對照。待瓊脂凝固後,倒置於36±1℃溫箱中培養48±2h。

 

5、觀察結果。

 

6、菌落計數方法:

做平板菌落計數時,可用肉眼觀察,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏,在計下各平板的菌落數後,求出同稀釋度的各平板平均菌落總數。

 

7、菌落計數的報告:

選取菌落數在30—300之間的平板作為菌落總數測定標準。一個稀釋度使用兩個平板,應採用兩個平板平均數,其中一個平板有較大片狀菌落生長時,則不宜採用,而應以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數,若片狀菌落不到平板的一半,而其餘一半中菌落分佈又很均勻,即可計算半個平板後乘以2以代表全皿菌落數。平皿內如有我鏈狀菌落生長時(菌落之間無明顯界線),若僅有一條鏈,可視為一個菌落;如有不同來源的幾條鏈,則應將每條鏈視為一個菌落計。

  

稀釋度的選擇:

    應選擇平均菌落數在30—300之間的稀釋度,乘以稀釋倍數報告之(見附表)。

    若有兩個稀釋度.其生長的菌落數無均在30—300之間,則視兩者之比如何來決定。若其比值小於或等於2,則應報告其平均數;若大於2則報告其較小的數字(見表中例2及3)。

  若所有稀釋度的平均菌落數均大於300則應按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表中例4)。

  若所有稀釋度的平均菌落數均小於30,則應按稀釋度最底的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表中例5)。

  若所有稀釋度均無菌落生長,則以小於1乘以最底稀釋倍數報告之(見表中例6)。

若有稀釋度的平均菌菌落數均不在30—300之間,其中一部分大於300或小於30時,則以最接近30或300的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表中例7)。

 

菌落數的報告:

菌落數在100以內時,按其實有數報告,大於100時,採用二位有效數字,在二位數字後面的有效數值,以四捨五入法計算。為了縮短數字後面的零數,也可以用10的指數來表示(見表中“報告方式欄”)。

營養瓊脂(NA)瓶裝顆粒培養基02.png


【品質控制】

1. 外觀方面

淡黃色顆粒,高壓滅菌後呈淡黃色透明無沉澱,傾注平皿冷卻後呈淡黃色凝膠。

 

2. 生物學方面

下列質控菌株接種待測試培養基,36℃±1℃培養18~24h,結果如下:

營養瓊脂(NA)瓶裝顆粒培養基01.png


【儲存條件及保質期】

貯存於避光、陰涼乾燥處;貯存期三年。

 

【注意事項】

1、稱量時注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統不適。

 

2、自製平板時需注意培養基的厚度,厚度過薄容易造成瓊脂水分保持性下降,開裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)體積培養基,平板培養基厚度至少為2mm。

 

【廢物處理】

檢測之後帶菌平板置於121℃下高壓滅菌30分鐘後處理。

 

【執行標準】

Q/HKSJ 03 普通微生物培養基




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